Introducción: La infección intrahospitalaria sigue siendo hoy un problema importante y debe someterse a permanente vigilancia y control.Aunque los antisépticos y desinfectantes y productos esterilizados han reducido la mortalidad la infección nosocomial aún tiene una notable incidencia. Objetivos:Determinar los principales agentes causantes de infección intrahospitalaria y su resistencia antimicrobiana en el Hospital Provincial Pediátrico Eduardo Agramonte Piña durante el periodo 2012-2013. Material y Métodos: Se realizó un estudio descriptivo sobre los microorganismos causantes de Infección Intrahospitalaria y su resistencia antimicrobiana.Los datos se obtuvieron del registro de Infecciones Intrahospitalarias del laboratorio de Microbiología del hospital, donde los microorganismos fueron identificados según las marchas técnicas del laboratorio. Resultados:Durante el período se reportaron 259 infecciones intrahospitalarias. Las Sepsis generalizadas,infecciones de  Piel y Mucosas y las Enfermedades Diarreicas Agudas fueron las infecciones más frecuentes. Los microorganismos gramnegativos fueron los que se aislaron en un número mayor de muestras destacándose: Pseudomonas, Klebsiella y Escherichia coli. Pseudomonas y otros bacilos gramnegativos presentaron mayor resistencia a, Cefotaxima, Meropenen y Cefazolina y mayor sensibilidad a la Ciprofloxacina. Los microorganismos grampositivos fueron sensibles a la Vancomicina en el 100% de los casos y presentaron mayor resistencia a Imipenem, Oxacillin y Ceftazidima. Conclusiones:Las Sepsis generalizadas,infecciones de piel y mucosas y las Enfermedades Diarreicas Agudas fueron las infecciones más frecuentes reportadas en niños.Los microorganismos gramnegativos se aislaron en un mayor número de casos.Todos los microorganismos presentaron una gran resistencia a los antimicrobianos.